STANDARDIZATION OF BOVINE PAPILLOMAVIRUS DNA EXTRACTION PROTOCOLS

A papilomatose bovina (PB) é uma doença infecciosa de grande impacto financeiro para a economia global, que acomete bovinos em qualquer fase do seu desenvolvimento, ocasionando papilomas principalmente na pele e em mucosas. O agente etiológico é o Bovine papillomavirus (BPV), já tendo sido descritos 43 tipos. A prevalência e epidemiologia do BPV no Estado de Goiás e Distrito Federal (DF) é deficiente, o que fortalece o objetivo do trabalho na perspectiva de atualização destes dados na região. Papilomas foram colhidos de bovinos, por método cirúrgico, em cinco regiões do Estado de Goiás e DF. Por meio de técnica fenol-clorofórmio foram extraídos os DNAs das amostras. A confirmação de BPV nas amostras se deu por técnica de PCR convencional, utilizando-se os primers degenerados FAP-59 foward e FAP-64 reverse. Uma vez obtido o amplicon esperado, realizou-se a purificação com kit de purificação DNA das amostras, seguido de nova corrida de eletroforese para que a qualidade da amostra fosse ideal para sequenciamento. Foi possível propor um protocolo de extração in house para extração de DNA de BPV em papiloma bovino, sendo a técnica viável e recomenda para uma triagem e posterior sequenciamento para detecção do tipo viral.