IDENTIFICAÇÃO DE FUNGOS FILAMENTOSOS ISOLADOS DA CASCA DE CAFÉ E DA MADEIRA ATRAVÉS DE TÉCNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR

Objetivo: O objetivo deste trabalho foi a identificação de fungos isolados da casca de café e da madeira para determinar e classificar a espécie de fungos em estudo. Métodos: O procedimento usado para extração do DNA genomico pelo método CTAB/NaCL 10%, onde foram avaliados a pureza dos DNA extraídos por meio da quantificação em Nanovue-GE para eletroforeses em gel de agarose a fonte foi regulada para uma tensão de 120 V e 80 Ma. Foram utilizados três conjuntos dos primers ITS1, ITS3, ITS4 e ITS5 nas amplificações utilizando estes iniciadores para as regiões de genes do rRNA 18S e regiões, a partir dos isolados dos fungos do DNAg obtido. Foram feitas purificações com o kit GeneJET para cada isolado que posteriormente foram enviadas para sequenciamento na empresa Helixxa, assim obtivemos as espécies especificas de cada isolado. Resultados: O consenso obtido foi submetido a uma busca por similaridades de nucleotídeos com uso do algoritmo BLAST que retornou um relatório informando detalhes de similaridade das sequências do banco. Os resultados confirmaram a identificação dos microrganismos como pertencentes aos gêneros Fusarium sp, Aspergillus westerdijkiae, Aspergillus westerdijkiae voucher, Mucor circinelloides strain, Fusarium lateritium strain, Cladosporium sphaerospermum strain e Trichoderma sp. Conclusão: Com isso, pode-se definir as possíveis aplicações tecnológicas como desenvolvimento de novas tecnologias de produção e aplicação de enzimas industriais, incluindo-se o emprego de microrganismos como produtores dessas enzimas e a utilização dos resíduos lignocelulósicos como substrato.